胞嘧啶碱基编辑器（Cytosine Base Editor, CBE）是由四个关键成分构成的先进生物工具，包括dCas9蛋白、sgRNA、胞嘧啶脱氨酶（cytidine deaminase）以及尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂（uracil DNA glycosylase inhibitor, UGI）。在细胞内，这些成分通过组装形成融合蛋白，利用sgRNA的引导与目标基因组DNA结合，暴露出靶序列的单链结构。随后，胞嘧啶脱氨酶会将单链上的胞嘧啶（C）脱氨变为尿嘧啶（U），并通过DNA复制或修复过程将U转变为胸腺嘧啶（T），最终实现C-G碱基对向T-A碱基对的精确转换。

在CBE的应用过程中，研究人员发现其能够产生中间产物脱氧尿嘧啶（dU）的特性，因此开发了名为Detect-seq的体外脱靶检测技术。该技术首先提取经过碱基编辑后的细胞基因组DNA，通过生物素标记CBE产生的dU以富集目标片段。同时，在dU位点的下游，正常的胞嘧啶（C）被替换为5-醛基胞嘧啶（d5fC），随后d5fC被化学标记为T。这样的设计使得在测序分析时，能够观察到众多串联的C-to-T突变信号，极大地提高了碱基编辑位点的快速定位效率。

相较于传统的GUIDE-seq、Digenome-seq和Cas-OFFinder等技术，Detect-seq展现出更高的灵敏性和特异性，同时具有无偏好性的检测能力。这意味着该技术不仅能够监测Cas9依赖型和非依赖型的脱靶效应，还能检测sgRNA结合区域外的编辑（out-of-protospacer edits）及靶向链编辑（target-strandedits）中的脱靶现象。

在过去两年中，尊龙凯时致力于构建一站式基因编辑安全性评估平台，涵盖靶点设计、靶点筛选、GUIDE-seq脱靶检测（细胞基础检测）、AID-seq脱靶检测（生化检测）、Detect-seq脱靶检测、脱靶验证、PEM-seq染色体重排检测、载体插入位点检测（升级版LM-PCR及液相杂交捕获测序）、克隆扩增分析、转录组脱靶检测及全基因组测序（WGS）脱靶检测等多条检测管线。同时，尊龙凯时实验室具备SGS认证、ISO9001质量体系认证以及生物安全二级实验室等多项资质，为客户提供持续稳定、优质、高效且安全的服务与产品。